生化胺基酸與蛋白質:結構、功能與代謝110-1 第67題

有關層析法(chromatography)應用在蛋白質的分離,下列敘述何者錯誤?

A.分子篩(size exclusion)是依照分子量大小來分離,大分子先出來
B.蛋白質A帶電荷為-3,蛋白質B帶電荷為+1,選擇陰離子交換樹脂進行層析時,蛋白質B先出來
C.蛋白質是否能從結合的樹脂上被沖洗出來,與移動相(mobile phase)的pH值和鹽離子濃度有關
D.親和性層析法乃是運用蛋白質不同的親疏水性進行分離✓ 正解

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親和性層析法是基於蛋白質與配體(ligand)的特異性親和力差異進行分離,而非依據親疏水性的差異。 **A.** 正確。分子篩層析依據分子大小分離,大分子無法進入孔隙,流經外側先流出;小分子進入孔隙,被滯留後才流出,因此大分子先溶出。 **B.** 正確。陰離子交換樹脂帶正電,蛋白質A(-3)與樹脂結合力強,蛋白質B(+1)與樹脂結合力弱,因此B先被沖洗出來。 **C.** 正確。pH值影響蛋白質所帶電荷,鹽離子濃度高時會競爭與樹脂的結合位點,兩者均影響蛋白質是否能被沖洗出來。 **D.** 錯誤。親和性層析是利用蛋白質與特定配體(如抗體、輔酶等)之間的特異性結合力進行分離,運用的是蛋白質與配體的親和力差異,而非親疏水性。親疏水性是逆相層析或疏水作用層析的分離原理。

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