生化胺基酸與蛋白質:結構、功能與代謝115-1 第68題

蛋白質純化可以根據溶解度、大小、電荷和結合親和力來純化。關於蛋白質純化,下列敘述何者錯誤?

A.蛋白質可以藉由半透膜(semipermeable membrane)透析,降低蛋白質溶液中的離子濃度
B.蛋白質可以藉由凝膠過濾管柱(gel-filtration column)根據蛋白質大小分離,其中較小的蛋白質會較快通過管柱✓ 正解
C.蛋白質可以藉由離子交換管柱(ion-exchange column),根據蛋白質淨電荷進行分離
D.組胺酸標記蛋白質(His-tagged protein)可以藉由 Ni²⁺金屬親和性管柱(metal affinity column)進行分離

詳解

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凝膠過濾層析是根據蛋白質的相對大小進行分離,大分子蛋白質因無法進入凝膠孔隙而先流出,小分子蛋白質進入孔隙中停留較久,因此**小蛋白質會較慢**通過管柱,與選項B敘述相反。 **A.** 正確。透析利用半透膜的選擇通透性,蛋白質分子無法通過膜孔,但小分子離子可通過,因此能有效降低蛋白質溶液中的離子濃度。 **B.** 錯誤。凝膠過濾管柱(凝膠層析)中,分子大小決定流出順序。大蛋白質無法進入凝膠內孔隙,沿著孔隙外側快速流出;小蛋白質進入孔隙內停留時間長,流出較慢。選項敘述顛倒因果關係。 **C.** 正確。離子交換管柱根據蛋白質的淨電荷分離。不同蛋白質在特定pH值下帶有不同電荷,可選擇陽離子或陰離子交換管柱進行分離。 **D.** 正確。組胺酸標籤與Ni²⁺具有特異性結

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