檸檬酸循環中的不可逆反應具有大負的自由能變化，由特定酵素催化，是循環調控的關鍵步驟。Citrate synthase催化的第一步反應因釋放能量最多，在生理條件下實質上不可逆。 **A. α-ketoglutarate kinase** - 此酵素不存在於檸檬酸循環。α-酮戊二酸脫羧酶複合體（α-ketoglutarate dehydrogenase complex）才是真正的酵素，催化可逆反應。 **B. citrate synthase** - ✓正確。催化乙醯輔酶A與草酸乙酯縮合生成檸檬酸，釋放大量能量（ΔG°'= -31.5 kJ/mol），在生理條件下實質不可逆，是循環的調控點。 **C. succinate thiokinase** - 即琥珀酸輔酶A合酶（succinyl-CoA synthetase），催化可逆反應，與GDP/GTP和Pi平衡有關。 **D. succinate dehydrogenase** - 催化琥珀酸氧化脫氫生成延胡索酸，為可逆反應，ΔG°'接近零。