生化核酸:結構與代謝、DNA複製與修補、轉錄作用、轉譯作用與基因表現調控、基因重組技術109-2 第79題

進行DNA聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction)時,關於反應混合物(reaction mixture)的描述,下列何者錯誤?

A.需要一個或多個模板去氧核糖核酸(DNA template)分子
B.需要一個寡核苷酸(oligonucleotide)引子(primer)✓ 正解
C.含熱穩定(thermostable)的去氧核糖核酸聚合酶(DNA polymerase)
D.含去氧核糖核苷三磷酸(dNTPs):去氧腺苷三磷酸(dATP)、去氧胞苷三磷酸(dCTP)、去氧鳥苷三磷酸(dGTP)、去氧胸腺苷三磷酸(dTTP)

詳解

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PCR反應需要**多個**引子才能有效進行雙向延伸,單一引子無法完成完整的PCR循環,因此B選項的描述不夠完整而錯誤。 **A.** 正確。PCR必須有DNA模板作為複製的起始材料,可以是單個或多個模板分子。 **B.** 錯誤。PCR需要**兩個**寡核苷酸引子(forward primer和reverse primer),分別與模板的兩條鏈互補配對,才能進行雙向延伸。僅用一個引子無法完成有效的PCR循環,無法達到指數級的DNA擴增效果。 **C.** 正確。PCR需要使用熱穩定的DNA聚合酶(如Taq polymerase),因為反應需經歷多個溫度循環(94-95°C變性、50-65°C退火、72°C延伸),普通DNA聚合酶會在高溫變性。 **D.** 正確。PCR反應必須含有四種dNTPs,供DNA聚合酶合成新的DNA鏈,缺少任何一種都會影響擴增效率。

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